- Mistä se on
- Kuinka se tehdään
- Elektroforeesityypit
- 1. Hemoglobiinin elektroforeesi
- 2. Proteiinielektroforeesi
Elektroforeesi on laboratoriotekniikka, jonka tarkoituksena on erottaa molekyylit niiden koon ja sähkövarauksen perusteella siten, että voidaan diagnosoida sairaudet, varmistaa proteiinien ilmentyminen tai tunnistaa mikro-organismit.
Elektroforeesi on yksinkertainen ja edullinen menetelmä, jota käytetään laboratorio-ohjelmissa ja tutkimusprojekteissa. Elektroforeesin tarkoituksen mukaan esimerkiksi diagnoosin saavuttamiseksi voi olla tarpeen suorittaa muita testejä ja kokeita.
Mistä se on
Elektroforeesi voidaan suorittaa erilaisiin tarkoituksiin, sekä tutkimusprojekteissa että diagnooseissa, koska se on yksinkertainen ja edullinen tekniikka. Siten elektroforeesi voidaan suorittaa:
- Tunnista virukset, sienet, bakteerit ja loiset, yleisimpiä tämä sovellus tutkimusprojekteissa; Isyystesti; Tarkasta proteiinien ilmentyminen; Tunnista mutaatiot, jotka ovat hyödyllisiä esimerkiksi leukemian diagnoosissa; Analysoi verenkierron hemoglobiinityyppejä hyödyllinen sirppisoluanemian diagnoosissa; Arvioi veressä olevien proteiinien määrä.
Elektroforeesin tarkoituksen mukaan lääkärin suorittama diagnoosi saattaa olla tarpeen suorittaa muita täydentäviä testejä.
Kuinka se tehdään
Elektroforeesin tekemiseksi on välttämätöntä geeli, joka voi olla polyakryyliamidista tai agaroosista objektista riippuen, elektroforeesipuskurista ja alvasta, molekyylipainomerkinnästä ja fluoresoivasta väriaineesta, UV- tai LED-valolaitteen lisäksi, joka tunnetaan myös nimellä transilluminator.
Geelin valmistuksen jälkeen on asetettava tietty esine siten, että kuopat tehdään geeliin, jota kutsutaan nimellä kammi, ja anna geelin asettua. Kun geeli on valmis, levitä aineet vain kaivoihin. Tätä varten molekyylipainomarkkeri on asetettava yhteen kuoppiin, positiivinen kontrolli, joka on aine, joka tunnetaan, mikä se on, negatiivinen kontrolli, joka takaa reaktion kelpoisuuden, ja analysoitavat näytteet. Kaikki näytteet on sekoitettava fluoresoivaan väriaineeseen, koska tällä tavalla on mahdollista visualisoida nauhat transilluminatorissa.
Geeli näytteiden kanssa on asetettava elektroforeesisäiliöön, joka sisältää spesifisen puskuriliuoksen, ja sitten laite kytketään päälle niin, että siinä on sähkövirta ja sen seurauksena potentiaaliero, mikä on tärkeätä erottamiselle hiukkaset niiden kuormituksen ja koon mukaan. Elektroforeettinen juoksuaika vaihtelee toimenpiteen tarkoituksen mukaan ja voi kestää jopa yhden tunnin.
Määritetyn ajan kuluttua on mahdollista tarkastella elektroforeesin tulosta transilluminaattorin läpi. Kun geeli asetetaan UV- tai LED-valoon, on mahdollista visualisoida vyöhykekuvio: mitä suurempi molekyyli, sitä pienempi sen kulkeutuminen, päästä lähemmäksi kaivoa, kun taas mitä kevyempi molekyyli on, sitä suurempi on siirtymispotentiaali..
Jotta reaktio voitaisiin validoida, positiivisen kontrollin nauhat on visualisoitava eikä negatiivista kontrollia saa visualisoida, koska muuten se on osoitus saastumisesta, ja koko prosessi on toistettava.
Elektroforeesityypit
Elektroforeesi voidaan suorittaa erilaisiin tarkoituksiin, ja tavoitteensa mukaan voidaan käyttää monentyyppisiä geelejä, joista yleisimpiä ovat polyakryyliamidi ja agaroosi.
Elektroforeesi mikro-organismien tunnistamiseksi tehdään yleisemmin tutkimuslaboratorioissa, mutta diagnoositarkoituksiin elektroforeesia voidaan käyttää tunnistamaan hematologiset sairaudet ja sairaudet, jotka kehittyvät proteiinimäärän kasvaessa, koska ne ovat pääoptimeja elektroforeesissa.:
1. Hemoglobiinin elektroforeesi
Hemoglobiinielektroforeesi on laboratoriotekniikka, jolla tunnistetaan veressä kiertävät erityyppiset hemoglobiinit, mikä mahdollistaa hemoglobiinisynteesiin liittyvien sairauksien tunnistamisen. Hemoglobiinityyppi tunnistetaan elektroforeesin avulla tietyllä pH: lla, mieluiten välillä 8, 0 - 9, 0, tarkistamalla vyöhykkeiden malli, jota voidaan verrata normaaliin kuvioon, mikä mahdollistaa epänormaalien hemoglobiinien esiintymisen tunnistamisen.
Mihin se tehdään: Hemoglobiinielektroforeesi suoritetaan tutkimaan ja diagnosoimaan hemoglobiinisynteesiin liittyviä sairauksia, kuten sirppisoluanemia ja hemoglobiini C -tauti, sen lisäksi, että ne ovat hyödyllisiä talassemian erottamisessa. Opi tulkitsemaan hemoglobiinielektroforeesi.
2. Proteiinielektroforeesi
Proteiinielektroforeesi on lääkärin pyytämä koe veressä liikkuvien proteiinien määrän arvioimiseksi ja siten sairauksien tunnistamiseksi. Tämä testi tehdään verinäytteestä, joka sentrifugoidaan, jotta saadaan plasma, veren osa, jonka muodostavat muun muassa proteiinit.
Elektroforeesin jälkeen voidaan visualisoida nauhojen kuvio ja myöhemmin käyrä, jossa kunkin proteiinifraktion määrä ilmoitetaan, joka on diagnoosin perusta.
Mihin se tehdään: Proteiinielektroforeesin avulla lääkäri voi tutkia multippelin myelooman, kuivumisen, kirroosin, tulehduksen, maksasairauden, haimatulehduksen, lupuksen ja verenpainetaudin esiintymisen nauhakuvion ja tutkimusraportissa esitetyn kaavion mukaan.
Ymmärrä miten se tehdään ja miten ymmärtää proteiinielektroforeesin tulos.